تناذر حثل دوشين العضلي
DMD1 – Duchene Muscular Dystrophy By PCR
التوصيف:
ينجم حثل دوشين العضلي وحثل بيكر Becker Muscular Dystrophy العضلي بفعل طفرات نقطية إما نقص Deletions أو تضاعف Duplications في المورثة DMD المكوِّدة للديستروفين Dystrophin. ويتجلى إطفرار هذه المورثة بطفرة انزياح قراءة Reading frame من المرسال المكوِّد لها. يُقدر تقريباً بأنَّ 65% من حالات هذا التناذر تُرد لطفرات النقص/التضاعف في الإيكسونات التعبيرية لهذه المورثة. ويمن أن تُرد هذه النسبة المرتفعة لحالة التناذر هذه, إلى طبيعة البروتين ديستروفين وأهميته في العضلات وطول المورثة الهائل البالغ 2.2 Mbp أيّ 2200 Kbp من الدنا. تقع هذه المورثة على الصبغي-X في الموقع Xp21.2, فهي مرتبطة بالجنس وذات تكرار مرتفع لدى الذكور كونها خاضعة لإشراف أليل متنحي, حيث أنه يكفي أليل مفرد لظهور التناذر عند الذكور XdY. ولذلك فإنَّ الإناث متخالفات اللواقح XDXd ناقلات للمرض لكنهن سليمات وينقلن المرض لــ 50% من أبنائهن الذكور.
التشخيص:
يشتمل مزيج المسابر P034/P035 مسابر نوعية لجميع إيكسونات المورثة DMD. كما ويوجد إضافة لذلك مسبرٌ واحد للإيكسون-1 البديل DP427c. لقد قُسِّمت المسابر الثمانين (80) إلى مجموعتين؛ وهما كافيتان لتقصي عدد نُسَخْ جميع الإيكسونات عبر تنفيذ تفاعلين اثنين فقط. ونظراً لعدد المسابر المرتفع في هذا المزيج, فإنَّ ذلك يُساعِدُ على كشف طفرات النقص/التضاعف بشكلٍ يتفوق على الطرق السابقة المطبقة على تقصي طفرات جميع إيكسونات هذه المورثة. وعلى سبيل المثال:
– لدى فحص 33 عينة دنا شُخِصَتْ سابقاً بأنها سليمة بالنسبة لإطفرار المورثة DMD بوساطة هذا المزيج من المسابر, فإنَّ 6 عينات منها كانت إيجابية النتيجة, بمعنى أنه توجد طفرات بنسبة 18.1% لدى العينات الــ 33.
ولقد تبين بأن 4 عينات منها ذات طفرات تضاعف Duplications و 2 منها ذات طفرات نقص Deletions. ولقد استطاع الباحث Schwarts وزملاؤه عام 2007م اكتشاف حالة فقدان/نقص للإيكسون-16 وأجزاء من الإنترونين 15 و 16 لدى ذكرٍ سليم لا يُعاني من هذا التناذر. وإن دلَّ ذلك على شيء فإنما يدل على كفاءة ودقة مزيج المسابر هذا. كما وأكد هذا الباحث على أنَّ إعادة ترتيب هذه المورثة Rearrangement غير مسؤول عن حدوث طفرة في هذه المورثة. قد صُمِمَ هذا التحليل الوراثي الجزيئي لكشف طفرات النقص/التضاعف في واحدٍ أو أكثر من الإيكسونات التعبيرية للبروتين ديستروفين العائدة للمورثة DMD. تؤدي مسابر كشف مواقع النقص إلى تراجع/نقص في منطقة قمة التضخيم لدى الذكور المصابين بهذا التناذر. ولقد لوحظ بشكلٍ مشابهٍ تراجعاً في منطقة قمة التضخيم لدى الإناث متخالفات اللواقح. كما أن طفرات النقص أو الاختلافات Polymorphisms في المناطق القريبة من هذه المورثة يمكن أيضاً أن تؤدي لتراجع/لنقص في منطقة قمة التضخيم. ولذلك فإنَّ النقص المكتشف بفعل مسبرٍ وحيدٍ يحتاج للتأكيد بطرقٍ أخرى.